在这里，我们描述了8个家庭中高雪氏病N370S创始人突变的成功NIPD。此外，我们对创始人AJ N370S关联的单倍型进行了精细定位，我们将其评估为NIPD的诊断工具。我们显示，只要父母纯合子不与共有的N370S序列重叠，通用单倍型就可以作为经典的基于家庭的单倍型的宝贵补充，或者在适当情况下甚至可以作为极具吸引力的替代物。因此，我们预测该诊断策略可能会在全球相关亚人群中用于更严重的常染色体隐性创始人突变测试。
这项研究的目的之一是减少单基因疾病NIPD的周转时间，以便在临床中实际应用。先前描述的方法需要数周才能做出诊断（5），从而增加了受影响的胚胎晚期妊娠终止的风险。相比之下，我们进行了为期5天的快速工作流程，可以在足够短的时间内促进对高危胎儿的可靠诊断，从而能够在早期妊娠中做出决策。另外，先前描述的方法需要高成本的材料，复杂的机械和/或大量的人员开销，特别是对于单倍型构造。使用我们的方法，可以容易地获得通用的预建创始人单倍型，以进行免费的胎儿DNA分析，而无需花费额外的金钱或时间。
利用NIPD中的通用创始人单倍型还有一个额外的好处。在进行胎儿分析之前进行连锁分析以推断父母等位基因时，杂合性通常会出现在突变携带者父母及其每个直系亲属中。在这种情况下，基于家庭的连锁不能将亲本SNPs与特定等位基因（野生型或突变型）相结合。但是，如果这些未分阶段的SNP也位于保守的创始人单倍型序列内，则该共有序列可用于定相不明确的SNP，最终可用于胎儿等位基因鉴定。创始人单倍型测试的成功帮助诊断了家庭1、2、4、5、6和8（图5，B，C，F，G，H和J），并且有望在今后的研究中受益于更多的创始人突变NIPD测试。
除了与单倍型相关的优势外，当我们从小的靶向测序组（包含500 kb的GBA侧翼序列）过渡到更大的靶向测序组（包括4 Mb的Gbp序列）时，我们针对高雪氏病的NIPD方法的重大进步显而易见。大湾区-侧翼序列）。虽然不可能长时间进行4 MB的纯合子混淆寻找周源性信息性SNP标记，但这种情况的可能性很小。
确实，当前研究中更大的测序小组证明，仅通过探测更大的基因侧翼区域，就可以在所有情况下至少鉴定出100个信息丰富的亲本标记。此外，尽管较大的面板在SNP标记可用性方面增加了NIPD测定所需的复杂性，但它同时通过描绘N370S创始人单倍型的上下边界，同时简化了胎儿分型。如上所述，这是对下游胎儿单倍型分析的宝贵帮助。而且，即使没有建立等位基因进行测试，较大的测序组也有助于非N370S GBA突变分析（例如，父系R496H等位基因，例如，在家族4中；图5E），因为通常在大分子Mb片段中更容易找到信息性标记。但是，在分析较大的基因组区域以进行胎儿诊断时，必须谨慎行事，避免因周生的减数分裂重组可能导致WT单倍型出现在突变的上游而突变的单倍型重组到下游或反之亦然的可能性而导致的陷阱（21）。如果不注意确保同一单倍型位于上游和下游DNA序列两侧，则这种重组事件可能导致误诊。单基因疾病的NIPD的另一个潜在陷阱是胎盘镶嵌症的现象（在非侵入性胎儿非整倍性测试领域已经引起误诊的情况）（22 – 28）。
鉴于孕妇循环胎儿的DNA来自胎盘（29），理论上讲，胎盘中存在两种不同的母本和/或父本单倍型可能会导致对无细胞胎儿单倍型的误解。因此，尽管这项原理证明研究的结果是积极的，但我们无法预测如果将来出现这种情况，两种不同的胎儿单倍型将如何有效地影响单基因疾病的无创胎儿诊断。无论如何，我们确实推测，基于单倍型的测试方法将比基于纯计数的方法（例如非侵入性非整倍性测试中的方法）为产前等位基因测量提供更强大的分析。在最坏的情况下，我们期望在NIPD分析中观察到结论性的胎盘镶嵌检查结果，而不是彻底的误诊。在这种情况下，
尽管如此，基于当前研究的非凡的临床前结果，在不久的将来非侵入性创始人突变产前检测的光明前景使我们感到鼓舞。因此，我们预测，共有单倍型介导的NIPD将很快成为全球范围内自交亚群中流行的创始人突变产前诊断的广泛工具。
详情可以咨询香港迩文基因巍新:EMAN-HK
这项研究的目的之一是减少单基因疾病NIPD的周转时间，以便在临床中实际应用。先前描述的方法需要数周才能做出诊断（5），从而增加了受影响的胚胎晚期妊娠终止的风险。相比之下，我们进行了为期5天的快速工作流程，可以在足够短的时间内促进对高危胎儿的可靠诊断，从而能够在早期妊娠中做出决策。另外，先前描述的方法需要高成本的材料，复杂的机械和/或大量的人员开销，特别是对于单倍型构造。使用我们的方法，可以容易地获得通用的预建创始人单倍型，以进行免费的胎儿DNA分析，而无需花费额外的金钱或时间。
利用NIPD中的通用创始人单倍型还有一个额外的好处。在进行胎儿分析之前进行连锁分析以推断父母等位基因时，杂合性通常会出现在突变携带者父母及其每个直系亲属中。在这种情况下，基于家庭的连锁不能将亲本SNPs与特定等位基因（野生型或突变型）相结合。但是，如果这些未分阶段的SNP也位于保守的创始人单倍型序列内，则该共有序列可用于定相不明确的SNP，最终可用于胎儿等位基因鉴定。创始人单倍型测试的成功帮助诊断了家庭1、2、4、5、6和8（图5，B，C，F，G，H和J），并且有望在今后的研究中受益于更多的创始人突变NIPD测试。
除了与单倍型相关的优势外，当我们从小的靶向测序组（包含500 kb的GBA侧翼序列）过渡到更大的靶向测序组（包括4 Mb的Gbp序列）时，我们针对高雪氏病的NIPD方法的重大进步显而易见。大湾区-侧翼序列）。虽然不可能长时间进行4 MB的纯合子混淆寻找周源性信息性SNP标记，但这种情况的可能性很小。
确实，当前研究中更大的测序小组证明，仅通过探测更大的基因侧翼区域，就可以在所有情况下至少鉴定出100个信息丰富的亲本标记。此外，尽管较大的面板在SNP标记可用性方面增加了NIPD测定所需的复杂性，但它同时通过描绘N370S创始人单倍型的上下边界，同时简化了胎儿分型。如上所述，这是对下游胎儿单倍型分析的宝贵帮助。而且，即使没有建立等位基因进行测试，较大的测序组也有助于非N370S GBA突变分析（例如，父系R496H等位基因，例如，在家族4中；图5E），因为通常在大分子Mb片段中更容易找到信息性标记。但是，在分析较大的基因组区域以进行胎儿诊断时，必须谨慎行事，避免因周生的减数分裂重组可能导致WT单倍型出现在突变的上游而突变的单倍型重组到下游或反之亦然的可能性而导致的陷阱（21）。如果不注意确保同一单倍型位于上游和下游DNA序列两侧，则这种重组事件可能导致误诊。单基因疾病的NIPD的另一个潜在陷阱是胎盘镶嵌症的现象（在非侵入性胎儿非整倍性测试领域已经引起误诊的情况）（22 – 28）。
鉴于孕妇循环胎儿的DNA来自胎盘（29），理论上讲，胎盘中存在两种不同的母本和/或父本单倍型可能会导致对无细胞胎儿单倍型的误解。因此，尽管这项原理证明研究的结果是积极的，但我们无法预测如果将来出现这种情况，两种不同的胎儿单倍型将如何有效地影响单基因疾病的无创胎儿诊断。无论如何，我们确实推测，基于单倍型的测试方法将比基于纯计数的方法（例如非侵入性非整倍性测试中的方法）为产前等位基因测量提供更强大的分析。在最坏的情况下，我们期望在NIPD分析中观察到结论性的胎盘镶嵌检查结果，而不是彻底的误诊。在这种情况下，
尽管如此，基于当前研究的非凡的临床前结果，在不久的将来非侵入性创始人突变产前检测的光明前景使我们感到鼓舞。因此，我们预测，共有单倍型介导的NIPD将很快成为全球范围内自交亚群中流行的创始人突变产前诊断的广泛工具。
详情可以咨询香港迩文基因巍新:EMAN-HK
