细胞铺板实验
主要分为3大步骤：收集细胞→细胞计数→细胞铺板。
一、收集细胞，制作单细胞悬液
这里需注意：
消化细胞需要选择适用的消化液、适当的消化温度和时间。建议新手或者养的是一个新细胞时，自己要观察最佳胰酶消化时间及浓度。
消化后需要轻轻拍打细胞贴壁面，震落细胞。
一般用1000rpm/min离心即可，离心力太大细胞容易抱团！
离心后，要充分悬浮！悬浮离心后的细胞团时，先不要把所有液体都加进去！一般先加2mL液体，然后用1mL移液器轻轻将细胞吹起（注意不要有气泡），细胞要像云雾一样散开，这样易于形成单细胞。此外，吹散次数过多也会影响细胞活力，所以要熟练操作，尽快上板。
二、细胞计数
取10 微升加4%台盼蓝计数活细胞。
三、细胞接种
需要根据实验目的选择不同规格的培养板。
① 稀释细胞：根据细胞计数结果后，将细胞稀释到目的浓度。
获得细胞悬液后要先根据选择的培养板的种类，以及要种的细胞密度调整细胞悬液的浓度，可在离心管中调整后反复颠倒摇匀，种板需要一步完成，切不可先加细胞后补液或先加液再补细胞。
tip：细胞密度对于铺板很重要，过密很容易造成细胞居中，细胞浓度过稀会造成细胞难以生长起来。
② 加入细胞悬液
（1）铺6孔板，12孔板或24孔板
为防止表面张力导致的中间液面太低细胞聚集的现象，通常在每一个孔加少量的无血清培养基，不用太多，浸润孔底即可。一般可加一个孔，浸润，再用移液枪移取，再加入第二个孔，浸润，依此类推。
如果培养液量少，由于瓶体内液体有向边缘吸的特性，所以造成中间低洼，细胞容易聚集，可以多加点液体缓解。
然后加入细胞悬液，从孔的左边靠近底部贴壁慢慢加入，这样加液后，细胞悬液会平铺在整个孔底，细胞分散较均匀，可以避免加在中间位置和加在周边晃匀后周边细胞局部太多的现象。
细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。如果有抱团的话，用手指从底部轻轻敲打，使之分散。
接下来，将板放在水平板面上“十字”形摇匀（上下左右四个方向进行移动，呈十字形状，重复5-6次），这一步很重要！不可以转圈摇，因为细胞会被带到中间。摇匀后要放工作台静置一下，等细胞贴壁了，轻轻移入到培养箱中。
（2）铺96孔板
可用排枪，每孔加入100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部缓慢加入（加样过快容易导致细胞聚集）。加完半边板48孔后，将剩下的未加的细胞悬液再混一下，再继续加剩余的半边板子。
加完所有的时候，盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度，敲三次即可，太大力或次数太多会导致细胞集中成堆。将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，然后静置约5min，放置培养箱。
注意事项：
★ 用排枪吸取时，一定要保证每个枪头吸上来的悬液体积一致。
★ 如果是用于进行MTS等长时间测试时，最外圈应空余出来（中间60孔为最佳），加入PBS或细胞悬液（做空白或阴性对照），以防止培养基蒸发引起的边缘效应。
培养箱里面或者外面尽量不要放可以产生振动的仪器，比如离心机、涡旋器一类的仪器。