1. 作用
· 增加样品密度：DNA 6×loading buffer（上样缓冲液）的主要成分包括甘油或蔗糖等物质。这些成分可以增加样品的密度，使得样品在点样后能够顺利地沉入到琼脂糖凝胶的加样孔底部。如果没有 loading buffer，DNA 样品的密度可能和电泳缓冲液相近，导致样品在加样孔中漂浮，不能很好地进入凝胶进行电泳分离。
· 指示电泳进程：loading buffer 中通常含有示踪染料，如溴酚蓝（bromophenol blue）和二甲苯青（xylene cyanol）。溴酚蓝在琼脂糖凝胶电泳中，其迁移速度大致相当于双链 DNA 片段大小为 300 - 400bp 的位置；二甲苯青的迁移速度稍慢，在琼脂糖凝胶中大致相当于 4 - 5kb 双链 DNA 的位置。通过观察这些染料的迁移情况，可以直观地判断电泳的进程，确定合适的电泳时间，避免 DNA 样品跑出凝胶而丢失。
· 稳定样品：它可以帮助维持 DNA 样品的稳定性，防止 DNA 在电泳过程中被核酸酶降解等情况的发生。同时，一定程度上保护 DNA 的结构，使其在电场作用下能够以相对稳定的状态进行迁移。
1. 使用方法
· 混合样品：将 DNA 样品与 6×loading buffer 按照一定比例混合。一般来说，DNA 样品体积与 6×loading buffer 体积之比为 5:1。例如，如果 DNA 样品体积是 10μL，那么需要加入 2μL 的 6×loading buffer，使最终的混合液中 loading buffer 的浓度达到 1×（因为是 6× 的原液，稀释后达到合适的工作浓度）。这样的比例可以保证上述作用的有效发挥，同时不会因为 loading buffer 过多而影响 DNA 样品的浓度和电泳结果。
· 点样：将混合好的样品小心地加入到琼脂糖凝胶的加样孔中。在加样过程中，要避免产生气泡，因为气泡可能会占据加样孔的空间，导致样品不能全部进入凝胶或者使样品的分布不均匀。可以使用微量移液器缓慢地将样品注入加样孔底部，使样品能够顺利地在凝胶中开始电泳。
· 电泳观察：在电泳过程中，观察示踪染料的迁移情况来判断电泳是否完成。当溴酚蓝或二甲苯青达到合适的位置（根据需要分离的 DNA 片段大小和实验目的确定），停止电泳，然后可以对凝胶进行后续的分析，如通过凝胶成像系统观察 DNA 条带等。
· 增加样品密度：DNA 6×loading buffer（上样缓冲液）的主要成分包括甘油或蔗糖等物质。这些成分可以增加样品的密度，使得样品在点样后能够顺利地沉入到琼脂糖凝胶的加样孔底部。如果没有 loading buffer，DNA 样品的密度可能和电泳缓冲液相近，导致样品在加样孔中漂浮，不能很好地进入凝胶进行电泳分离。
· 指示电泳进程：loading buffer 中通常含有示踪染料，如溴酚蓝（bromophenol blue）和二甲苯青（xylene cyanol）。溴酚蓝在琼脂糖凝胶电泳中，其迁移速度大致相当于双链 DNA 片段大小为 300 - 400bp 的位置；二甲苯青的迁移速度稍慢，在琼脂糖凝胶中大致相当于 4 - 5kb 双链 DNA 的位置。通过观察这些染料的迁移情况，可以直观地判断电泳的进程，确定合适的电泳时间，避免 DNA 样品跑出凝胶而丢失。
· 稳定样品：它可以帮助维持 DNA 样品的稳定性，防止 DNA 在电泳过程中被核酸酶降解等情况的发生。同时，一定程度上保护 DNA 的结构，使其在电场作用下能够以相对稳定的状态进行迁移。
1. 使用方法
· 混合样品：将 DNA 样品与 6×loading buffer 按照一定比例混合。一般来说，DNA 样品体积与 6×loading buffer 体积之比为 5:1。例如，如果 DNA 样品体积是 10μL，那么需要加入 2μL 的 6×loading buffer，使最终的混合液中 loading buffer 的浓度达到 1×（因为是 6× 的原液，稀释后达到合适的工作浓度）。这样的比例可以保证上述作用的有效发挥，同时不会因为 loading buffer 过多而影响 DNA 样品的浓度和电泳结果。
· 点样：将混合好的样品小心地加入到琼脂糖凝胶的加样孔中。在加样过程中，要避免产生气泡，因为气泡可能会占据加样孔的空间，导致样品不能全部进入凝胶或者使样品的分布不均匀。可以使用微量移液器缓慢地将样品注入加样孔底部，使样品能够顺利地在凝胶中开始电泳。
· 电泳观察：在电泳过程中，观察示踪染料的迁移情况来判断电泳是否完成。当溴酚蓝或二甲苯青达到合适的位置（根据需要分离的 DNA 片段大小和实验目的确定），停止电泳，然后可以对凝胶进行后续的分析，如通过凝胶成像系统观察 DNA 条带等。
