成分
· TAE 缓冲液:由 Tris 碱、冰乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成。
· TBE 缓冲液:由 Tris 碱、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成。
pH 值
· TAE 缓冲液:pH 值通常为 8.3 左右。
· TBE 缓冲液:pH 值一般为 8.0 左右。
缓冲能力
· TAE 缓冲液:缓冲容量相对较小,长时间电泳时,如过夜电泳,其缓冲能力可能不足以维持稳定的 pH 值,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
· TBE 缓冲液:具有较强的缓冲能力,能够在较长时间的电泳过程中更好地维持溶液 pH 的稳定,更适合长时间电泳。
对 DNA 迁移率的影响
· TAE 缓冲液:双链线状 DNA 在其中的迁移率较 TBE 缓冲液快约 10%,超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量,电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果。
· TBE 缓冲液:DNA 分子在其中的迁移速度相对较慢,但在分离小于 1kb 的 DNA 片段时,能够提供更高的分辨率,使条带更清晰。
与琼脂糖凝胶的相互作用
· TAE 缓冲液:与琼脂糖凝胶的相互作用较弱,不会产生明显的电渗作用,对 DNA 片段的回收率影响较小,常用于 DNA 片段的回收电泳。
TAE速溶颗粒
· TBE 缓冲液:易与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物,造成高电渗作用,使 DNA 片段的回收率降低,因此不宜在回收电泳中使用。
对酶活性的影响
· TAE 缓冲液:对一些酶的抑制作用相对较小,如限制性内切酶等,更适合用于涉及这些酶的实验。
· TBE 缓冲液:其中的硼酸盐成分可能会对某些酶的活性产生一定的抑制作用,如 DNA 连接酶等,在进行涉及这些酶的后续实验时需要谨慎使用。
成本与制备
· TAE 缓冲液:成分相对简单,成本较低,制备也较为容易.
TBE 缓冲液:由于硼酸的成本相对较高,且在一些实验室中使用
· 频率相对较低,其制备成本可能会稍高,且获取的便捷性可能不如 TAE 缓冲液。
· TAE 缓冲液:由 Tris 碱、冰乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成。
· TBE 缓冲液:由 Tris 碱、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成。
pH 值
· TAE 缓冲液:pH 值通常为 8.3 左右。
· TBE 缓冲液:pH 值一般为 8.0 左右。
缓冲能力
· TAE 缓冲液:缓冲容量相对较小,长时间电泳时,如过夜电泳,其缓冲能力可能不足以维持稳定的 pH 值,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
· TBE 缓冲液:具有较强的缓冲能力,能够在较长时间的电泳过程中更好地维持溶液 pH 的稳定,更适合长时间电泳。
对 DNA 迁移率的影响
· TAE 缓冲液:双链线状 DNA 在其中的迁移率较 TBE 缓冲液快约 10%,超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量,电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果。
· TBE 缓冲液:DNA 分子在其中的迁移速度相对较慢,但在分离小于 1kb 的 DNA 片段时,能够提供更高的分辨率,使条带更清晰。
与琼脂糖凝胶的相互作用
· TAE 缓冲液:与琼脂糖凝胶的相互作用较弱,不会产生明显的电渗作用,对 DNA 片段的回收率影响较小,常用于 DNA 片段的回收电泳。
TAE速溶颗粒
· TBE 缓冲液:易与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物,造成高电渗作用,使 DNA 片段的回收率降低,因此不宜在回收电泳中使用。
对酶活性的影响
· TAE 缓冲液:对一些酶的抑制作用相对较小,如限制性内切酶等,更适合用于涉及这些酶的实验。
· TBE 缓冲液:其中的硼酸盐成分可能会对某些酶的活性产生一定的抑制作用,如 DNA 连接酶等,在进行涉及这些酶的后续实验时需要谨慎使用。
成本与制备
· TAE 缓冲液:成分相对简单,成本较低,制备也较为容易.
TBE 缓冲液:由于硼酸的成本相对较高,且在一些实验室中使用
· 频率相对较低,其制备成本可能会稍高,且获取的便捷性可能不如 TAE 缓冲液。