检测吧 关注:12,927贴子:75,195
  • 0回复贴,共1

植物甾醇有哪些检测方法呢

只看楼主收藏回复

在黄橙橙的玉米,雪白的芝麻,圆溜溜的大豆,饱满的小麦,熟了的高粱等,以及坚果和植物种子中,都可以提取出来一种植物甾醇。常见的植物甾醇,包括β-谷甾醇,菜油甾醇,豆甾醇,谷甾烷醇等。经过研究证明,植物甾醇具有一定的抗氧化作用,能够降低血液中的胆固醇。植物甾醇属于三萜烯化合物,具有甾核或甾体。植物甾醇的结构和胆固醇是非常相似的,不同的是植物甾醇C24处,通常会连接一个甲基或乙基基团。

植物甾醇的检测方法有多种,比如,高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、气相色谱-质谱(GC-MS)法、液相色谱-质谱(LC-MS)法、薄层分析法、比色法等。
以高效液相色谱(HPLC)法为离子,简单的说明介绍一下。

检测内容包括:前处理方法,色谱条件,色谱峰,标准曲线,含量计算等。
1.前处理:样品一般是植物,通常情况下采用超声,或皂化的方法。比如,将待测的样品,粉碎,研磨,加入乙酸乙酯溶剂。之后,进行超声处理。最后,使用乙酸乙酯定容。
2.色谱条件:使用HPLC检测,采用高效的,优质的,C18色谱柱。柱温30℃或指定的其他温度。乙腈-水或甲醇-乙腈为流动相,流速为1.0ml/min。检测器主要是蒸发光散射检测器(ELSD),如果是甾醇酯的话,有用紫外检测器的。进样量的话,一般是10ul,根据实际情况进行调整。这些条件,都是要经过验证才能使用的。在不同的实验条件,比如设备,样品,溶剂,温度等不同,测定的色谱条件也会有变化的。其主要目的,是尽可能的获得准确的,有效的色谱峰。

3.样品中的甾醇,经过色谱柱的吸附分配,在流动相下的冲洗下逐步分离出来。浓度由低到高,再有高到低,在检测器中获得对应的信号,软件中记录成色谱峰的形式。对色谱峰面积进行积分,通过稀释标准品,至少6个点的浓度,记录对应的色谱峰,并绘制标准曲线,得到回归方程。

4.对样品的测定,在一定程度上考验了色谱技术。为什么这么说呢?正常的情况下,样品会分离出相对理想的色谱峰,能够顺利的完成含量计算。但是,有的时候会出现各种鬼峰,或色谱柱出现堵塞,或流动相和样品出现反应,或压力不够,或温度不稳定。在标准的情况下,相当于模拟实验;有样品的时候,就是真实的测定。可能样品中含有其他的化合物,对流动相或色谱柱产生了一定的负面作用。它并不像标准品那样纯粹。
5.根据标准曲线,是可以得到植物对应甾醇含量的。有的时候,需要注意相关系数r2和重复性RSD,回收率也是不能忽略的。在计算含量的时候,如果还要注意稀释倍数,否则出现的结果就不准确了。


IP属地:上海1楼2024-12-30 15:46回复